檢測(cè)原理

試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被呼吸道合胞體病毒抗原的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUTOFF值相比較，從而判定標(biāo)本中牛呼吸道合胞體病毒抗體（RSV-Ab）的存在與否。

試劑盒組成

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各50μL；

3.  待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；

4.  隨后陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。

8.

結(jié)果判斷

 1.  試驗(yàn)有效性：陽性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；

                陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽性

試劑盒性能

1.  準(zhǔn)確性：陽性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15，說明試驗(yàn)結(jié)果有效。

2.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

3.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

4.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

5.  有效期：6個(gè)月

上海舒話生物是一家集科研、生產(chǎn)、銷售為一體的生物，以科研試劑生產(chǎn)、診斷試劑原料供應(yīng)產(chǎn)品生產(chǎn)為核心，致力于為全球來自高等院校、政府研究機(jī)構(gòu)、診斷試劑生產(chǎn)廠家以及生物公司的廣大客戶們提供高質(zhì)量生物產(chǎn)品，產(chǎn)品擁有質(zhì)量保證，有問題免費(fèi)包換，還可以免費(fèi)代測(cè)，想進(jìn)一步了解我們的產(chǎn)品歡迎您前來詳詢。